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病原微生物检测解决方案

2019-09-09 16:39:05 点击次数:1078次


1 病原微生物简介

病原微生物是指可以侵犯人体,引起感染甚至传染病的微生物,包括真菌、细菌、朊毒体、寄生虫、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、病毒等。它们可引起人类的伤寒、痢疾、结核、破伤风、麻疹、脊髓灰质炎、肝炎、艾滋病、禽流感、牛炭疽等,以及植物的小麦赤霉病、大豆病毒病等。微生物对人类最重要的影响之一是导致传染病的流行。在人类疾病中有50%是由病毒引起。世界卫生组织公布资料显示:传染病的发病率和病死率在所有疾病中占据第一位。

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2 病原微生物检测方法简介

2.1生物化学方法

生化方法检测病原微生物实际上是测定微生物特异性酶。由于微生物所具有的系统不完全相同,对许多物质分解能力亦不一致。因此可利用不同底物产生的不同代谢产物来间接检测该微生物内酶的有无,从而达到检测待定微生物的目的。例如,辛酯酶法检测沙门氏菌。

2.2血清免疫学方法

免疫学技术是利用特异性抗原抗体反应,观察和研究组织细胞、特定抗原(抗体)的定性和定量技术。预先将某种标记物结合到抗体上,借标记物的荧光或酶的有色反应、放射性或高电子密度,在光镜或电镜下进行定性、定位或定量研究。常见的有荧光抗体技术和酶联免疫技术。

2.3分子生物学方法

分子生物学及分子遗传学的发展,使人们对微生物的认识逐渐从外部结构特征转向内部基因结构特征,微生物的检测也相应从生化、免疫方法转向基因水平的检测。例如核酸杂交法,PCR及其衍生技术,基于16S rRNA的检测技术。

2.4生物传感器鉴定方法

生物传感器是将传感器技术和分子诊断技术相结合而成的一种新技术。生物传感器包含两部分,即分子识别器件和换能器。例如,利用大肠杆菌抗体的免疫吸附反应,使用集成化SPR传感器快速检测大肠杆菌O157:H7,采用亲和素-生物素系统放大检测的反应信号并引入复合抗体作为二次抗体,使该传感器对大肠杆菌的检测限由106cfu/ml下降到105cfu/ml。

2.5生物芯片法

生物芯片技术是将生物大分子,如寡核苷酸cDNA、基因组DNA、肽、抗原以及抗体等固定在诸如硅片、玻璃片、塑料片、凝胶和尼龙膜等固相介质上形成生物分子点阵,当待测样品中的生物分子与生物芯片的探针分子发生杂交或相互作用后,利用激光共聚焦显微扫描仪对杂交信号进行检测和分析。根据芯片上探针的分子种类可分为DNA芯片和蛋白质芯片。

2.6蛋白质指纹图谱法

蛋白质指纹图谱技术用于各种疾病特异性蛋白指纹的识别和判断,可以直接检测不经处理的尿液、血液或细胞裂解液等。患病后人体血清里的蛋白质成分和含量会发生变化,分析得到特异的指纹图谱。

我司技术平台简介

以上方法学在检测速度,检测灵敏度和检测成本上有一定局限性。我司根据数字PCR高灵敏度、高耐受性、多色多重以及快速检测等几个方面的优势,切入到病原微生物的定性检测,尤其对苛养菌和真菌的检测,更能凸显dPCR的优势。

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